42天解锁病毒入侵“密钥”：新冠病毒陌生又狡猾(2)

　　控制病毒的关键之一在于准确认识其感染机制，进而针对重要靶点开展药物筛选和疫苗研究。“与细菌不同，病毒的一大突出特点是，脱离开细胞后生存能力非常有限，只有进入细胞才能复制出‘子孙万代’，进而侵蚀人体内脏。”张林琦说，因此，研究病毒如何进入细胞这一步非常关键。病毒表面蛋白是病毒进入细胞的关键“钥匙”，它可以打开细胞受体蛋白的“锁”，进入细胞并启动其复制过程。机体的保护性抗体反应，正是通过识别和阻断“钥匙”与“锁”的结合，从而阻断病毒进入细胞。“现在疫苗研发的关键靶点就是针对新型冠状病毒的这把‘钥匙’展开的。”张林琦说。

　　两个课题组决定利用X射线衍射技术，解析新冠病毒表面刺突糖蛋白受体结合区RBD与人受体ACE2蛋白复合物的晶体结构，进而探索病毒入侵之奥秘。

　　可新型冠状病毒，是那么陌生，又是那么狡猾，每一天的疫情数据，都让张林琦和王新泉感到焦灼。两个课题组的研究不断提速、提速，以期尽快看到病毒的模样，找到解锁病毒的“密钥”。

　　1月11日，复旦大学公布首个新型冠状病毒基因序列。此后，两个课题组进入马拉松式的接力模式。

　　珍贵的晶体

　　分析实验结果、策划下一个实验、开会讨论、跟科研单位沟通反馈信息、与国外的合作伙伴对接……每一天，课题组中的每一个人都在争分夺秒。

　　连轴转的张林琦，几乎忘了白天黑夜，每天脑海中盘旋的“除了新冠，还是新冠”；王新泉的睡眠时间也极度压缩，有时深夜一两点还在给学生回邮件，几乎每天，他都要通过电话、微信，与兰君他们沟通实验进展……

　　一周时间，合成所需基因片段；再一周，完成病毒包装、病毒扩增、表达纯化蛋白……

　　“最开始纯化出的RBD蛋白性质不均一，当中有单体和二体两种状态，且两种状态都与受体蛋白结合。”王新泉回忆，“后来，我们把这种复合的RBD蛋白与ACE2混合后，通过反复的纯化步骤，最终才得到了相对均一的单体RBD蛋白和受体ACE2的复合物。”

　　复合物出炉之后，是晶体生长。需要在不同种类的液体条件中筛选晶体，“能否成功，谁也不知道。”兰君说，他们只能不断地准备复合物，一批一批地筛选。在尝试了上百个条件之后，才终于找到一个条件，能够生长出衍射条件比较好的晶体。

　　第一批晶体出炉，可质量不理想。又花了四天左右的时间优化晶体。此时，已是2月15日。

　　晶体得到了，难题又来了——怎么送到上海同步辐射光源（我国大陆第一台中能第三代同步辐射光源）。这一步很关键。用X射线对晶体进行衍射，得到的晶体三维结构分辨率更高，能把“解锁”过程观察得更加清楚。

　　“晶体需用小液氮罐保存，以往一般由学生送去上海，可寒假期间人手紧张，一去一回，还得隔离观察14天，人手更有限了。”王新泉说。几经周折，通过合作伙伴，他们联系到一位司机，连夜开车，赶在第二天下午将晶体送达上海同步辐射光源。那天是2月17日，刚好赶上装置检修前的最后一天机时。

　　课题组通过远程操作，利用上海光源BL17U线站收集分辨率为2.45埃的衍射数据，并解析其三维空间结构。