《自然》刊发港大研究:金仓鼠实验提示新冠可气溶胶传播(2)
为了研究SARS-CoV-2在仓鼠中通过气溶胶的传播能力,研究者将供体(接受新冠病毒接种)仓鼠和幼稚仓鼠(健康仓鼠)分别放在两个相邻的铁笼中,在供体仓鼠接种病毒后1天,将两个笼子共同放置8小时。
供体仓鼠洗鼻液中的传染性病毒能够排毒6天,而病毒的RNA则可连续检测14天,也就是说,在后期,被感染的仓鼠不具备传染能力。
在接种病毒后2天、4天、6天的供体粪便样本中能检测到病毒RNA,但不是具备传染性的病毒。
研究者发现,新冠病毒在仓鼠中的气溶胶传播是有效的,因为在接触后1天所有暴露的接触仓鼠鼻洗液中都检测到传染性病毒,在接触后3天病毒载量达到峰值。
尽管未分离出具有感染性的病毒,但从感染的气溶胶接触物的粪便样本中能连续14天检测到病毒RNA 14天。
接触气溶胶的仓鼠在接触后7 天显示出最大的体重减轻(平均值±SD,-7.72±5,42%,N = 3)。与供体仓鼠相比,气溶胶接触仓鼠在鼻洗液中排出了相当数量的病毒。
为了评估新冠病毒在仓鼠中的其他传播能力,研究者将3只供体仓鼠经鼻内接种8×10负4次方的TCID50病毒。接种后24小时,将每个供体转移到新的笼子中,并与一只幼年仓鼠一起饲养。研究者每天监测体重变化和临床体征,每隔一天从供体仓鼠和接触仓鼠收集鼻洗液,持续14天。在供体仓鼠中,尽管连续14天都能检测到病毒RNA,但感染性病毒的峰值出现在接种病毒后早期,随后迅速下降。
接种SARS-CoV-2后6天,仓鼠表现出最大的平均体重减轻(平均值±SD,-11.97±4.51%,N = 6)。
从供体到接触者的传播非常高效,在接触后1天,就能从共居仓鼠中检测到SARS-CoV-2,在接触后3天的共居仓鼠鼻洗液中检测到了病毒载量峰值。
共居仓鼠在接触后6天出现最大的平均体重减轻(平均值±SD,-10.68±3.42%,N = 3),接触后11天,所有动物均恢复原始体重。
使用PRNT分析,从接种病毒后14天的供体上(所有滴度为1:640)和共居仓鼠接触后13天(以1:160、1:320和1:160滴度)检测中和抗体。研究者连续14天从供体仓鼠的鼻洗液中检测到病毒RNA,但传染性病毒滴度迅速下降。研究者重复了该实验,并以接种病毒后6天供体仓鼠与幼稚仓鼠共居。在接触后3天,共居幼稚仓鼠鼻洗液中能够检测到少量病毒RNA,在接触后7天的鼻洗液中检测到不到病毒RNA。而且,在鼻洗液中未检测到传染性病毒。
并且共居仓鼠没有显示出体重减轻。
PRNT分析未检测到接触后12天的共居仓鼠的中和抗体(<1:10)。结果表明,接种SARS-CoV-2的供体的病毒可传播时间短于6天。从供体到共居接触者的后续传播与在供体鼻洗液中检测到感染性病有关,而与能否检测到病毒RNA无关。
SARS-CoV-2在金仓鼠中的发病机制
实验中,研究者给金仓鼠鼻内感染了8 x 10的负4次方TCID50(50%组织细胞感染量)的新冠病毒(Beta-CoV / Hong Kong / VM20001061 / 2020病毒,GISAID#EPI_ISL_412028)。该病毒是从香港一位新冠肺炎患者的鼻咽抽吸物和咽拭子的Vero E6细胞中分离出来的。研究者分别在金仓鼠接种病毒后的2天、5天、7 天时收集了鼻甲、脑、肺、心脏、十二指肠、肝脏、脾脏和肾脏组织,以监测病毒复制和组织病理学变化。在接种病毒后第2天时,能检测到金仓鼠肺部病毒载量峰值,在接种病毒后5天时病毒载量开始降低。尽管能继续检测到高拷贝的病毒RNA,但在接种病毒后7天未检测到具有传染性的病毒。