石正丽新研究：病毒与宿主间有进化军备竞赛，需持续监控蝙蝠(3)

综上所述，这些数据表白ACE2变异体已经在差异地域的中华菊头蝠种群中恒久存在。与SARS病毒的S-RBD直接打仗的位点的代替，表白它们在SARS病毒的进化和流传进程中大概具有重要成果。

中华菊头蝠ACE2变体对SARS相关冠状病毒传染表示出的差异敏感性

为了评估差异的中华菊头蝠ACE2分子是否会影响SARS病毒和蝙蝠SARS相关冠状病毒的进入，研究者在HeLa细胞中瞬时表达了中华菊头蝠的ACE2的变体，并测试了携带差异刺突卵白的SARS病毒伪型或蝙蝠SARS相关冠状病毒的进入效率。

4株蝙蝠SARS相关冠状病毒凭据S1序列可分为4个基因型。简朴地说，与SARS病毒的刺突卵白对比，SARS相关病毒RsWIV1的RBD与SARS病毒具有氨基酸高度同一性；RsWIV16是SARS病毒的明日亲，在NTD和RBD均表示氨基酸高相似；Rs4231在NTD上与SARS病毒有着高度的氨基酸相似度；而RsSHC014在NTD和RBD区域与SARS病毒均有差别。

与之前的研究功效雷同：所有四株具有沟通基因组配景但差异刺突卵白的蝙蝠SARS相关冠状病毒毒株，都可以操作人类ACE2举办相似程度的复制。

然而，它们在如何操作中华菊头蝠ACE2方面存在一些差别。所有测试病毒都能有效操作等位基因1、2、4、5进入。具有沟通RBD的RsWIV1和RsWIV16则不能利用来自广东的等位基因6(样本ID 1434)。具有沟通RBD的Rs4231和RsSHC014不能别离利用来自云南和广东的等位基因7(样本ID 3357)和等位基因8(样本ID 1438)。SARS病毒BJ01与WIV1和WIV16的RBD有很高的相似性，可以或许在假型传染尝试中利用与Rs4231和RsSHC014沟通的蝙蝠ACE2等位基因。

这些功效表白，病毒进入细胞都受到刺突RBD和中华菊头蝠 ACE2变异体的影响。

蝙蝠ACE2残基突变会影响其与SARS相关冠状病毒RBD的团结亲和力

为进一步相识SARS病毒和SARS相关冠状病毒对ACE2利用本领差异，研究者表达了冠状病毒BJ01、RsWIV1、RsWIV1、RsSHC014的RBD，和3其中华菊头蝠的ACE2，别离是等位基因6(样本1434)，等位基因7(样本3357)和等位基因2(样本5720)。

随后，研究者测试它们之间的亲和力。阳性比较为SARS病毒BJ01的RBD 与人ACE2，阴性比较为SARS病毒RsWIV1的RBD 与人DPP4。及时阐明表白，基于均衡解离常数KD，差异RBD与ACE2的团结亲和力差异。

与病毒传染尝试功效一致，发明1434ACE2(等位基因6)与RsSHC014和BJ01团结，而与RsWIV1的RBD不团结；研究还发明3357ACE2(等位基因7)与RsWIV1团结，但不与RsSHC014和BJ01的RBD团结；5720ACE2(等位基因2)被发明能团结所有测试的RBD。所有被测试的RBD都与人类或蝙蝠ACE2具有很高的团结亲和力。然而，与两种蝙蝠SARS相关冠状病毒的RBD对比，它对中华菊头蝠ACE2的团结亲和力较低。

这些功效表白，刺突RBD与ACE2的团结亲和力影响病毒的传染本领。

SARS相关冠状病毒RBDs与中华菊头蝠ACE2s彼此浸染的布局模子

4个蝙蝠SARS相关冠状病毒的刺突卵白巨细沟通，与SARS-CoV的氨基酸同源性高出90%，表白这些卵白具有228个相似的布局。在本研究中，他们利用中华菊头蝠ACE2 3357（等位基因7)构建了蝙蝠SARS相关冠状病毒RsSHC014 RBD的布局巨大模子，并用中华菊头蝠ACE2 1434(等位基因6)构建了蝙蝠SARS相关冠状病毒RsWIV1 RBD的布局巨大模子。

这与SARS-CoV RBD与人类ACE2的团结亲和尝试功效一致。与SARS-CoV RBD和人类ACE2界面的打仗残基对比，可以调查到ACE2上的两个病毒病毒团结热点(hotspot hotspot Lys31和Lys353别离由Glu35和Asp38构成的盐桥)或四周的变革。如前所述，这两个热点埋没在疏水情况中。它们为病毒-受体团结彼此浸染提供了大量的能量，并填补了团结界面上疏水性叠加238彼此浸染的要害旷地。