是“金”子，总会发光！(2)

事实上，国际上有5个团队先后对该技能有过摸索，但因诸多技能障碍没有攻陷，如存在无可制止的“配景噪声”导致特异性差，金离子无法有效进入细胞，不耐化学牢靠剂，合成纳米金颗粒效率低且颗粒极小等，因此，迄今无人开拓乐成细胞超微布局单分子程度的可克隆电镜标志技能。

2010年，入职北京生命科学研究所后，何万中成立团队开始致力于攻陷上述困难。经验3年艰巨摸索，始终存在的非特异性配景噪声成为他们迟迟难以打破的技能障碍，个中一位认真该金颗粒合成的工程师认为乐成但愿迷茫，无奈之下，他放弃项目分开了团队。

何万中不宁肯甘心就此止步，“观念有了，就是一步步办理这个要害问题的事儿，我相信必定可以或许办理的。”

“意外的收获”

做生物物理学交错研究多年的何万中，抉择自学化学常识攻陷这个困难，他把本身关在办公室研读化学文献。

在一个周末，他阅读的一篇文献提到，一价金离子可以与氮、氧、硫等诸多元素有着差异的团结强度（与硫团结比氮氧更强），他顿时遐想到一价金离子与差异含巯基（含硫）化合物之间也有差异团结强度。这使他面前一亮：卵白质的20种氨基酸由碳、氢、氧、氮、硫等有限几种元素构成的，假如设计一种要领，找到一种与金离子团结的含硫（巯基）化合物做回响前体，让金离子只与标志上的半胱氨酸的硫团结，而不与其他元素组合，不就可以形成特异性纳米金颗粒同时制止配景噪声了么?

因为手边没有现成化合物，他当场取材，在尝试室找到巯基乙醇，并“随意”插手含0.1%的氯金酸试管中，现场所成金的硫醇盐做前体，功效发明本应污浊的液体居然是透明的。因无法短期内提纯这种金的硫醇盐，于是他把这种“透明”溶液，直接插手了含有比较卵白和别的两种标志卵白的三个离心管中，溶液依然透明（意味着没有形成金颗粒）。

此时，他想到了Brust-Schiffrin要领(BSM)合成硫醇(RSH)包被的纳米金颗粒根基道理，便立马又插手了强还原剂硼氢化钠溶液，令人意外的现象产生了：含比较卵白的谁人离心管里依然无色透明，而含标志卵白的两个离心管酿成了深棕色！ “这很有大概意味着配景噪声的消失。”何万中说。

于是，第二天他找团队新成员、有着化学配景的金秀梅开展反复尝试，功效怎么都反复不出来，原因在于前一天的“随意”尝试没有严格浓度节制。颠末许多次差异浓度的配比摸索，终于发明，当在硫醇阴离子与三价金离子浓度比率≥2:1的条件下，上述现象再次重现了。

随后，颠末理论和尝试阐明，何万中发明：经典的BSM合成纳米金颗粒凡是是在硫醇阴离子与三价金离子浓度比率< 2:1条件举办，会形成巯基与金离子形成1:1 RSAu(I)链状聚合物经Au（I）离子间的范德华力聚积为成核中心，再经强还原剂硼氢化钠还原成纳米金颗粒。

而此刻发明的硫醇阴离子与三价金离子的浓度比率≥2:1条件，可形成另一种2:1 的可溶RSAu(I)金硫醇盐，不能自发形成成核中心（这就是节制样品中没有形成金颗粒的原因），何万中把这种机拟定名为“自成核抑制机制（ANSM）”。

何万中表明，当把富含半胱氨酸的标志卵白插手ANSM的回响体系时，标志卵白上的巯基与金离子会形成RSAu(I)雷同的链状聚合物成为成核中心，此时溶液里完全没有非标志的自成核链状聚合物（配景噪声），因此插手强还原剂硼氢化钠溶液后在标志卵白上特异性合成纳米金颗粒就绝不奇怪了！