是“金”子，总会发光！(3)

这是一个由于尝试时试剂浓度不严格而带来的“意外”科学发明。“ANSM金颗粒合成化学道理的要害发明，为后续可克隆标志技能在细胞中的实现与优化奠基了坚硬的理论基本。”何万中欢快地说。

随后，何万中带着团队又耗费7年时间，攻陷了可克隆电镜标志技能在细胞的开拓实现中的一系列技能挑战。

他们首先乐成开拓了一系列针对纯化的标志卵白特异性合成2-6 纳米巨细的金颗粒技能，并证明纳米金颗粒时在单个标志分子上形成的。操作简朴的原核细胞 (大肠杆菌系统)探索优化出细胞中的标志卵白上特异性合成纳米金颗粒的尝试方案，得到了前所未有超高标志效率。

此时，受过细胞电镜制样技能系统练习的博士生姜招弟插手团队，主攻在真核细胞应用中的困难。颠末技能摸索和迭代演进，他们将细菌和酵母中探索出来的金颗粒合成技能推广至哺乳动物细胞。

研究人员用冷冻替代牢靠条件下只用鞣酸(tannic acid)与醋酸铀连系的低温脱水牢靠，制止利用巯基氧化剂和醛牢靠剂，实现担保细胞超微布局下高效合成纳米金颗粒，且不再受标志卵白折叠状态限制。

经试验测试证明，该方案已经高度成熟有效，反复率极高，可以遍及推广利用。“这也意味着终于全面攻陷了在担保细胞超微布局前提下如安在标志卵白上高效合成纳米金颗粒的困难。”何万中说。

“做真正原创技能”

令研究人员感想欣喜的尚有，他们开拓的基于自成核抑制机制在富含半胱氨酸标志卵白上合成纳米金颗粒技能，合成条件较量温和，靠近生理条件，可用来开拓一系列新型单分子探针。譬喻，他们操作大肠杆菌表达纯化的绿色荧光卵白纳米抗体(GBP) 与 MT标志的融合卵白GBP-MT， 可乐成免疫标志细胞中表达的绿色荧光标志卵白，这显示出该技能可遍及用来标志今朝已有绿色荧光卵白标志的各类细胞及动物组织。

另外，在其他通用抗体、冷冻电镜分子标志等也具备应用潜力。

论文3位审稿人均对该研究给以高度评价。“该技能是对前人提出的基因编码电镜标志观念的深入摸索与实现……总体看，我认为这项事情会很是有用”“该研究有望成为电子显微学规模里程碑式的论文”“我认为这项事情是细胞生物学研究要领的重大希望”。

何万中感想收获的喜悦的同时，他坦承，这场“大冒险”很“折腾”，需要超长的耐力，需要不绝摸索积聚直至灵感闪现的时刻。尽量半途有许多次发文章的时机，但他们都刻意沉下心，必然要把问题研究透彻，直到真正缔造出可在将来几十年甚至更长时间里被遍及应用的新技能。

“从发论文效率上来看，我是个失败者；但从真正创新意义上来说，我是乐成的。”何万中同时指出，“此项马拉松式的原创研究事情的乐成，离不开北京生命科学研究所这种非凡扶助体制，以及王晓东所长对原创事情的充实领略和刚强支持。”

接下来，他但愿进一步优化技能，从单分子标志拓展到两个、三个甚至更多方针分子的同时标志；通过一些设计，提高分子的表达量，开拓适应各类条件的、对方针分子影响更小的标志技能等，让该技能得到国际同行的遍及应用。

相关论文信息：DOI: https://doi.org/10.1038/s41592-020-0911-z

新型可克隆电镜表技能的实现

何万中和三位第一作者（从右至左：何万中，姜招弟，金秀梅，李玉华）