国内心脏干细胞研究陷入“造假大地震”？
■本报记者 甘晓 见习记者 高雅丽
10月23日晚上7点，复旦大学附属中山医院心内科的年轻医生白英楠刚刚结束诊疗。这两天，她的名字不断以中文、英文的形式频繁出现在网络上，和科研造假、学术不端联系了起来。
白英楠感到有点冤。她对《中国科学报》记者表示：“我没有任何科研造假的行为。”
和白英楠一样处境尴尬的，还有一位心脏干细胞领域的研究者。在最近的一次学术会议上，好几位大同行向他悄悄打听：“新闻上说你搞的那个心脏干细胞是假的啊？”
因美国哈佛大学医学院建议撤回Piero Anversa的31篇论文，国内心脏干细胞研究者陷入“造假大地震”疑云。《中国科学报》记者经深入调查发现，国内心脏干细胞研究集中在讨论各类干细胞治疗心脏病的临床前研究，与涉嫌造假的c-kit阳性心脏干细胞分化无关。尽管如此，该领域实验的可重复性也应得到足够重视，警惕“假阳性”结果贸然发布。
c-kit在国内
让白英楠陷入尴尬的这件事，起因要追溯到2010年初。结束研究生阶段对内皮祖细胞研究的白英楠，经过一名日本教授的推荐，被复旦大学派往Anversa实验室做访问学者。
近3年里，白英楠被安排在一位叫Polina Goichberg的研究员的小组里，研究ephrinA1这个信号通路对c-kit阳性心脏干细胞修复心肌作用的影响。“Anversa实验室分工明确，我所在的小组只负责心梗小鼠的动物实验部分，在此之前的c-kit阳性心脏干细胞分离培养，以及后续的检测其迁移情况的体内实验，都是由其他小组操作。”白英楠表示。
2011年，《循环研究》杂志发表了该实验室有关ephrinA1的研究，加上通讯作者Anversa本人共有16名作者，白英楠位列第二。2011年至2015年期间，另外4篇有关ephrinA1的研究论文陆续发表，都带上了白英楠的名字。
2012年底，白英楠结束访问学者工作回到复旦大学中山医院，没有带回更多的与c-kit阳性心脏干细胞相关的信息，生活的重心也从科研变成了治病。“很可惜我没有申请到课题，相关研究工作都停止了，也没有再发表过论文。”她表示。
事实上，在造假“实锤”前，c-kit阳性心脏干细胞已经陆续受到其他研究小组的质疑。质疑的焦点是，重复开展的实验中，没有观察到c-kit阳性心脏干细胞的分化。
据《中国科学报》记者对中文论文的查实，国内心脏干细胞研究者大多来自医学院，对心脏干细胞临床使用问题最为关心。因此，与c-kit阳性心脏干细胞的相关研究主要集中在临床前，已被证实有效干细胞与其他因子如何协同配合、解决如何移植和归巢等临床问题是其主要创新点。而更基础的、曾引发争议的“作用机制”方面，则缺乏实证研究。
2016年一篇发表在《生理科学进展》上的综述文章描绘了关于c-kit阳性心脏干细胞的研究现状，其行文逻辑也从侧面体现出国内该领域研究的思路——好用是关键。文章指出，c-kit阳性心脏干细胞在心肌梗死、心力衰竭等心脏疾病中的作用得到了多项体内外实验及临床试验的证实，但“其治疗机制仍在争议中”。
自Anversa先后发表c-kit阳性心脏干细胞可以分化成心肌细胞的结果后，将攻克心脏病作为毕生事业的复旦大学附属中山医院心内科主任、中科院院士葛均波萌生了尝试新型的c-kit阳性心脏干细胞治疗心脏病的想法。
从Anversa实验室获知c-kit阳性心脏干细胞的细节时，作为一名临床医生，葛均波也否认了其在临床上使用的可能。“Anversa提出取得c-kit阳性心脏干细胞的一个条件，必须做左心房的心肌活检，这需要在左心房开一个差不多5毫米深的口子，而左心房本身厚度只有4毫米左右，就像一张薄纸。当时我就觉得这样操作会有让心脏破裂的风险，还要得到伦理委员会的批准，很难做得下去。”葛均波说。
换句话说，c-kit阳性心脏干细胞的问题在于作用机制，国内的研究大多则跳过了验证机制，直接进入更下游的效果方面。如果研究者在效果观察的实验中没有撒谎，因c-kit阳性心脏干细胞造假而被怀疑的集体造假便无从发生。
除了临床前研究，国内鲜有基础研究着眼于细胞示踪技术。此前，细胞示踪技术存在的瑕疵成为对c-kit阳性心脏干细胞是否分化的争论关注点之一。普遍采用的细胞示踪技术需要对所观察的细胞进行染色，存在一定染错率。同时，标记c-kit阳性心脏干细胞达不到百分之百准确，会“渗漏”到其他类型的细胞上。例如，“渗漏”到心肌细胞中，实验者就会观察到心肌细胞的后代，并将它们误认为是由c-kit阳性心脏干细胞分化的细胞。
为此，近年来，中科院上海生科院生物化学与细胞生物学研究所研究员周斌研究组对c-kit阳性心脏干细胞进行遗传谱系示踪，结果发现不论是在心脏的生理稳态还是心脏梗死后，c-kit阳性细胞都极少贡献心肌细胞。
为了验证假设，课题组采用即时谱系示踪的方法，将非心肌细胞和新产生的心肌细胞标记上与现存的心肌细胞不同的荧光标记，证明了c-kit阳性心脏干细胞在心脏生理稳态和损伤修复中主要贡献的是冠状动脉内皮细胞，而不是心肌细胞。
用干细胞治疗心脏的思路一起“凉凉”？
更进一步，国内有关用干细胞治疗心脏病的研究，亦在此次被疑“跟风”学术造假的范畴内。
复旦大学附属中山医院心内科教授黄浙勇告诉《中国科学报》记者，目前新闻报道中的“心脏干细胞”，是指心脏自身的干细胞。而希望用来治疗心脏病的干细胞，远不止c-kit阳性心脏干细胞这一种。
人的许多成体器官中自身包含一些干细胞，让其受伤后可以不断再生。长期以来“心肌梗死或心肌受损后不能有效自我修复”是科学界的共识，因此如何修复受伤的心肌，成为科学家需要攻克的难题。
直到2003年，Anversa发表论文称发现了心脏原位的“c-kit阳性心脏干细胞”。c-kit是细胞表面的一种受体，Anversa自称发现了带有这种标记物的心脏干细胞，并以此命名。
此后，多个研究小组重复了Anversa的实验，并对结果提出了质疑，都是围绕c-kit阳性心脏干细胞开展。最新的进展在今年8月，周斌在《循环》杂志发表实验结果显示不存在心脏干细胞。
